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HRP标记链霉亲和素可以用于生物素标记的抗体、核酸、蛋白或其它生物素标记分子的检测。具体用途包括Western、ELISA、免疫组化或免疫细胞化学、原位杂交、Southern、Northern、EMSA等。

Streptavidin的分子量为52kD，可以高度特异性地和生物素(Biotin)结合。Streptavidin和生物素的亲和常数为Kd=10-15M。Streptavidin是一个4聚体蛋白，可以同时结合4个生物素分子。Streptavidin的中文名为链霉亲和素，从Streptomyces adidinii中纯化获得，和鸡蛋清来源的Avidin(亲和素)在空间结构以及与生物素的亲和力方面具有高度的相似性。和Avidin不同的是，Streptavidin是一种非糖基化蛋白，并且基本不带电荷。Avidin的pI=~10.5，在中性pH条件下呈碱性。由于Streptavidin和Avidin相比在中性条件下不带电荷，因此Streptavidin的非特异性结合比Avidin低很多，这样检测时的非特异性背景就低很多。因此目前在生物素检测时通常使用Streptavidin替代Avidin。

辣根过氧化物酶即horseradish peroxidase (HRP)，可以在Western、EMSA、Southern或Northern等检测时催化ECL类试剂(如ECL、BalbECL等)产生化学发光，可以在ELISA时催化TMB产生蓝色，也可以在免疫组化、免疫细胞化学或Western blot检测时催化DAB产生棕色沉淀。

本辣根过氧化物酶标记Streptavidin的浓度为1mg/mL。本制品用于各种常规用途的推荐稀释比例参考下表，实际实验操作过程中需根据具体情况适当调节辣根过氧化物酶标记Streptavidin的稀释比例。对于Western，推荐的稀释范围为1:2000～10,000。

WB	IHC/IC/ISH	ELISA	Southern/Northern	EMSA
1:2000～10,000	1:200～500	1:2000～10,000	1:2000～5000	1:2000～5000

本HRP-Streptavidin用高纯度的Streptavidin和超纯的辣根过氧化物酶交联而成，确保产生最低的本底和最高的灵敏度。不同浓度生物素标记二抗使用本制品进行显色检测效果参见图1。

图1．本制品的检测效果图。使用兔抗山羊抗体对96孔板进行包被和封闭后，将生物素标记山羊抗小鼠IgG(货号：YTC0286)稀释至图中所示各浓度，加入各反应孔中室温孵育1小时；洗板后，分别加入100ng/mL的辣根过氧化物酶标记Streptavidin本制品和国外T公司的同类产品，室温孵育25分钟；洗板后，加入100μL TMB显色液(货号：YT076)，室温避光孵育5分钟后加入TMB终止液(货号：YTB0715)并在450nm检测吸光度。图A为使用本制品和国外T公司同类产品进行检测的标准曲线，生物素标记二抗浓度为横坐标，A450为纵坐标。图B为检测低浓度的生物素标记二抗的吸光度。图中可见，在比较适宜的生物素标记样品浓度范围内，本制品的检测信号比国外T公司同类产品高约1倍。实测数据会因试剂、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。

组分	200μL	1mL	5mL
HRP标记链霉亲和素	200μL	1mL	5mL
说明书	1份

保存：-20℃，有效期1年。


如果用于常规的Western检测，以每次检测需10mL 1:2000稀释的本制品计，本制品0.2mL包装可以检测40次，1mL包装可以检测200次，5mL包装可以检测1000次。

• 叠氮钠会抑制辣根过氧化物酶的活性，在含有辣根过氧化物酶的溶液中不可加入叠氮钠。
  
• 本制品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

Western、ELISA、免疫组化或免疫细胞化学、原位杂交、Southern、Northern、EMSA等请参考相关实验步骤进行。起始稀释浓度按照产品简介中推荐的稀释比例进行稀释。
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